尼洛替尼/达希纳( nilotinib,1)，有机化学名叫4- 甲基-N-[3-(4- 甲基-1H- 咪唑-1- 基)-5-( 三氟甲基) 苯基]-3-[[4-( 吡啶-3- 基) 嘧啶-2- 基] 羟基] 苯甲酰胺，商品名达希纳(Tasigna)，是由瑞士诺华药业公司产品研发的ABL 酪氨酸激酶缓聚剂[1]。该药于2007 年10 月获英国FDA 准许发售，关键用以医治以往医治抗药性或不耐受的费城染色体呈阳性的漫性髓性败血症(Ph CML) 病发期或加快期成年人病人[2,3]。现阶段并未见相关1 原辅料产品质量标准科学研究的参考文献报导，为科学研究并操纵1 的品质，本科学研究依据1 的结构类型及加工工艺线路( 图1)，生成了很有可能存有的5 种相关物质[4,5]，并开展了构造确诊。
3-(4- 甲基-1H- 咪唑-1- 基)-5-( 三氟甲基) 苯胺( 2) 是生成1 的关键化工中间体，而生成2 常用的原材料4- 甲基咪唑带有加工工艺中不可以除掉的4- 乙基咪唑、咪唑及2,4- 二甲基咪唑。他们会和3- 溴-5- 三氟甲基苯胺反映，生成3-(4- 乙基-1H- 咪唑-1- 基)-5-( 三氟甲基) 苯胺、3-(1H- 咪唑-1- 基)-5-( 三氟甲基)-苯胺和3-( 2,4- 二甲基-1H- 咪唑-1- 基) -5-( 三氟甲基) 苯胺。除此之外，4- 甲基咪唑存有2 个活力反映结构域(N3 及N5)，3- 溴-5-( 三氟甲基) 苯胺与N3反映，转化成甲基对映异构物质3-( 5- 甲基-1H- 咪唑-1-基) -5-( 三氟甲基) 苯胺。从2 中带到的这4 个残渣化工中间体参加事后反映，转化成与原辅料有关的残渣4- 甲基-N-[3-(4- 乙基-1H- 咪唑-1- 基)-5-( 三氟甲基) 苯基]-3-[[4-( 吡啶-3- 基) 嘧啶-2- 基] 羟基]-苯甲酰胺(B)，4- 甲基-N-[3-(1H- 咪唑-1- 基)-5-( 三氟甲基) 苯基]-3-[[4-( 吡啶-3- 基) 嘧啶-2- 基]-羟基] 苯甲酰胺(C)，4- 甲基-N-[3-(2,4- 二甲基-1H- 咪唑-1- 基)-5-( 三氟甲基) 苯基]-3-[[4-( 吡啶-3- 基) 嘧啶-2- 基] 羟基] 苯甲酰胺(D) 和4-甲基-N-[3-(5- 甲基-1H- 咪唑-1- 基)-5-( 三氟甲基)-苯基]-3-[[4-( 吡啶-3- 基) 嘧啶-2- 基] 羟基] 苯甲酰胺(E)。
相关物质A 是生成1 的最后一步反映中羟醛缩合不彻底而残余的化工中间体。本科学研究以三氯化铁溶液为碱，加温至80 ℃对4- 甲基-3-[[4-(3- 吡啶基)-2- 嘧啶基] 羟基] 苯甲酸乙酯(3) 开展水解反应获得。
参考参考文献，用3- 溴-5-( 三氟甲基) 苯胺和4-乙基-1H- 咪唑反映获得的3-(4- 乙基-1H- 咪唑-1-基) -5-( 三氟甲基) 苯胺，与酰氯化的A 缩合反应制取相关物质B[6]。
相关物质C 和D 的生成方式末见参考文献报导。本科学研究在调查1- 溴-3- 氟苯-5- 三氟二甲苯和3- 溴-5- 三氟甲基苯胺的反映活力差别后，首先用1- 溴-3-氟苯-5- 三氟二甲苯和咪唑或2,4- 二甲基-1H- 咪唑反映制取氟苯替代物，氟苯复原后获得3-(1H- 咪唑-1- 基) -5-( 三氟甲基) 苯胺或3-(2,4- 二甲基-1H-咪唑-1- 基) -5-( 三氟甲基) 苯胺，最终与酰氯化的A 缩合反应获得相关物质C 和D.
相关物质E 的生成方式也末见参考文献报导。在生成时发觉，参考相关物质B ～ D 的生成方式制取相关物质E 的成品率均非常低( 绝大多数转化成4- 甲基物质)，故本科学研究挑选从2 的水解液中根据制取高效液相的方式分离出来制取3-(5- 甲基-1H- 咪唑-1- 基) -5-( 三氟甲基) 苯胺，再与酰氯化的A 缩合反应制取相关物质E.
试验一部分
4- 甲基-N-[3-(4- 乙基-1H- 咪唑-1- 基)-5-( 三氟甲基) 苯基]-3-[[4-( 吡啶-3- 基) 嘧啶-2- 基]-羟基] 苯甲酰胺( 相关物质B)
在50 ml 三颈瓶中添加4- 乙基-1H- 咪唑(1.2 g,12.1 mmol)、碳酸钾(2.2 g,15.8 mmol)、碘化亚铜(0.4 g,2.3 mmol)、8- 甲基喹啉(0.3 g,1.5 mmol)和DMF(20 ml)，N2换置3 次能常温下拌和20 min,迟缓滴入3- 溴-5-( 三氟甲基) 苯胺( 3.6 g,15.1 mmol) 的N- 甲基吡咯烷酮( 5 ml) 水溶液，滴毕后提温至120 ℃反映20 h.制冷至室内温度，添加水(30 ml)，用乙酸丁酯( 40 ml) 提纯，有机相用饱和状态氯化钠溶液(30 ml×3) 清洗，经无水硫酸钠干躁后过虑，渗沥液用活性碳脱色1 h,缓解压力蒸干后获得深咖啡色固态(2.3 g)。添加二甲苯(10 ml) 溶清后迟缓减温至-5 ℃析晶，同温拌和5 h,过虑得淡黄色固体(1.26 g)，立即用以下步反映。
4- 甲基-N-[3-(1H- 咪唑-1- 基)-5-( 三氟甲基)-苯基]-3-[[4-( 吡啶-3- 基) 嘧啶-2- 基] 羟基] 苯甲酰胺( 相关物质C)
在50 ml 三颈瓶中添加咪唑(1.15 g,16.9 mmol)、碘化亚铜(0.48 g,2.5 mmol)、碳酸钾(2.56 g,18.5 mmol) 和DMF(20 ml)，N2换置3 次能常温下拌和20 min,迟缓滴入1- 溴-3- 氟苯-5-( 三氟甲基)-苯(5.0 g,18.5 mmol) 的THF 水溶液(5 ml)，滴毕升温至120 ℃反映24 h.制冷至室内温度，添加水(30 ml)和乙酸丁酯(30 ml) 提纯，有机相用饱和状态氯化钠溶液(30 ml×3) 清洗，经无水硫酸钠干躁后过虑，渗沥液缓解压力蒸干，个人所得灰黑色油状物质用酒精(10 ml) 融解后，添加活性后的锌粉(2.2 g,33.8 mmol)，拌和制冷至0 ℃，迟缓滴入冰乙酸(15 ml)，滴毕反映20 min 后过虑，渗沥液缓解压力蒸除绝大多数有机溶剂，废弃物中添加14％氢氧化钠(25 ml)，用乙酸丁酯(20 ml) 提纯，有机相缓解压力蒸干，剩下暗黄色油状物质经柱色谱仪[ 过柱剂：二氯甲烷∶三乙胺(10 ∶ 0.1) →二氯甲烷∶乙醇∶三乙胺(9.5 ∶ 0.5 ∶ 0.1) ] 分离出来，得淡黄色固体(1.15 g)，立即用以下步反映。
4- 甲基-N-[3-(5- 甲基-1H- 咪唑-1- 基)-5-( 三氟甲基) 苯基]-3-[[4-( 吡啶-3- 基) 嘧啶-2- 基]-羟基] 苯甲酰胺( 相关物质E)
取2 的反映液( 按参考文献实际操作[ 7]，3-( 5- 甲基-1H- 咪唑-1- 基) -5-( 三氟甲基) 苯胺成分≤ 3％，100 ml) 浓缩后经制取型液相色谱仪[HPLC 法：离子交换柱 Luna 5u C18 柱(21.2 mm×150 mm,5 μm)；流动性相 0.1％氢氧化钠∶乙腈(90 ∶ 10→20 ∶ 80)；水流量20 ml/min；检验光波长 254 nm；柱温 30 ℃ ] 分离出来，获得类乳白色固态( 0.23 g)。再参考相关物质B 的生成方式实际操作，得类乳白色固态E( 0.21 g,42％ )，mp 251 ～ 252 ℃。纯净度99.5％ (HPLC 方式跟上面一样，相对性1 的保存期为0.92)。ESI-MS(m/z) : 530[M H] ；1H NMR(400 MHz, CDCl3)δ: 9.32(d, J=1.6 Hz, 1H, ArH) , 8.85( d, J=1.6 Hz, 1H, ArH) ,8.68( dd, J=4.8、1.6 Hz, 1H, ArH) , 8.62( s, 1H,CONH), 8.55(d, J=5.3 Hz, 1H, ArH), 8.38(dt, J=8.0、1.9、1.9 Hz, 1H, ArH), 8.10(t, J=1.8 Hz, 1H, ArH),7.97(s, 1H, ArH), 7.62(s, 1H, ArH), 7.60(dd, J=7.8、1.8 Hz, 1H, ArH), 7.42(dd, J=7.8、4.8 Hz, 1H, ArH),7.38(d, J=8.0 Hz, 1H, ArH), 7.31(s, 1H, ArH), 7.25(d,J=5.3 Hz, 1H, ArH), 7.16(s, 1H, NH), 6.93(s, 1H,ArH), 2.46(s, 3H, CH3), 2.25(s, 3H, CH3)。
